Dott.MorenoZolghetti
2009-03-17 21:23
DETERMINAZIONE QUALITATIVA DELL'EMOGLOBINA (SANGUE)
Nelle urine di soggetti sani non si deve riscontrare traccia di emoglobina (che deriva dalla lisi delle emazie). Ogni reperto positivo è patologico.
Per il test si usa il reattivo di Thèvenon e Rolland:
piramidone 10 g
alcol etilico 95% 100 mL
Conservare in frigorifero, in bottiglia scura, ben chiusa.
Il procedimento è il seguente:
a 3 mL di urina (meglio se presi sul fondo del contenitore) aggiungere 5 gocce di acido acetico al 10% (per provocare l'emolisi delle emazie), quindi 1 mL di reattivo. Agitare bene. Aggiungere 0,5 mL di acqua ossigenata al 3,6% (12 volumi). Se è presente emoglobina, dopo alcuni secondi, si sviluppa una colorazione blu-viola più o meno intensa, in rapporto alla quantità di emoglobina presente.
RICERCA DEI CORPI CHETONICI
Si tratta di tre sostanze differenti (acetone, acido acetacetico e acido betaidrossibutirrico) che nelle urine di persone sane non risultano presenti. Per la loro determinazione si ricorre alla reazione di Legal.
A 5 mL di urina si addizionano 5 gocce di nitroprussiato sodico in soluzione al 10%, poi qualche goccia di soluzione di idrossido di sodio al 20%. Compare una colorazione rosso mattone, che in presenza di corpi chetonici, vira rapidamente al violetto se si aggiungono 5 gocce di acido acetico al 10%. Se invece i corpi chetonici risultano assenti l'aggiunta dell'acido acetico schiarisce la soluzione rossastra.